Ma'lum bo'lgan mozaik embrion ko'chirish natijasida mozaikaga chalingan chaqaloqning tug'ilishi: holat hisoboti

Semra Kahraman, Murat Cetinkaya, Beril Yuksel, Mesut Yesil, Karolin Pirkevi Cetinkaya, ma'lum bo'lgan mozaik embrion ko'chirish natijasida mozaikaga chalingan chaqaloqning tug'ilishi: kasallik hisoboti, Insonning ko'payishi, 35 -jild, 3 -son, 2020 yil mart, 727 -betlar. 733, https://doi.org/10.1093/humrep/dez309

Xulosa

Mozaik embrionlar implantatsiya qilish va sog'lom bolalarga aylanish imkoniyatiga ega. Hozirgi vaqtda mozaik embrionlarni ko'chirish, ARPdan o'tayotgan ayollar uchun, anevloidiyalar uchun preimplantatsiya genetik tekshiruvi va euploid embrionlar bo'lmagan taqdirda, ayniqsa, tuxumdon zaxirasi kamaygan va/yoki ona yoshi katta bo'lgan ayollar uchun mumkin bo'lgan variant hisoblanadi. Bu sog'lom bolalarga olib kelishi mumkin bo'lgan potentsial hayotiy embrionlarni tashlamaslikka yordam beradi. Mozaikaga bag'ishlangan 500 dan ortiq tadqiqotlarda, mozaik embrionlar ko'chirilgandan keyin tug'ilgan chaqaloqlarda mozaika haqida hech qanday ma'lumot yo'q. Bu erda biz 39 yoshli ayolning tuxumdon zaxirasi kamaygan, faqat bitta blastokist bo'lgan, tropektoderm biopsiyasi mumkin bo'lgan holat haqida hisobot taqdim etamiz. Monosomiya 2 ning 35% mozaikasini ko'rsatgan embrionning o'tkazilishi homiladorlikka olib keldi.Amniyosentezda mozaik trisomik mos46, XX (98)/47, XX,+2 (2) karyotipi aniqlandi. Batafsil ultratovush tekshiruvida patologik topilmalar topilmadi va homila homilaning normal o'sishini ko'rsatdi, bachadon ichi o'sishining kechikishi aniqlanmadi. 37 -haftada sog'lom qiz bola tug'ildi. Periferik qon xromosomalarini tahlil qilish floresans bilan tasdiqlangan.joyida duragaylash 2% mozaik monosomiya 2 ni ko'rsatdi [mos45, XX, -2 (2)/46, XX (98)]. Bu ma'lum bo'lgan mozaik embrionning ko'chirilishidan keyin tirik tug'ilishga olib keladigan haqiqiy xomilalik mozaikaning birinchi holatidir. Dunyo bo'ylab prenatal tashxis, embrionlarda mozaika sifatida qayd etilganidan keyin, mozaikaning kamayib ketganligini ko'rsatdi. Bizning holatimiz erta amniyosentez orqali, eng yaxshisi, homiladorlikning 14 xaftaligidan oldin tug'ruqdan keyingi kuzatuv va tashxis qo'yish zarurligini ko'rsatadi.

Kirish

Xromosoma mozaikasi embrion ichidagi ikki yoki undan ko'p hujayrali chiziqlar sifatida aniqlanadi va IVFdan olingan inson embrionlarida nisbatan keng tarqalgan topilma hisoblanadi. Mozaizm urug'lantirilgandan so'ng, odatda birinchi uchta bo'linishdan keyin yuzaga keladigan mitotik xatolardan kelib chiqadi (Baart va boshq., 2006; Fraguli va boshq . 2011; Taylor va boshq ., 2014). Tropektoderm biopsiyasida mozaikaning paydo bo'lishi 4% dan 32% gacha har xil qayd etiladi (Fraguli va boshq. , 2011 ; Capalbo va boshqalar , 2013; Fragouli va boshqalar, 2017; Xarton va boshq., 2017; Vera-Rodriges va Rubio) , 2017) .Yangi avlod ketma-ketligi (NGS) joriy etilishi bilan xromosoma mozaikasini 20 dan 80%gacha aniqlash mumkin. Mozaika atamasi keng doirani qamrab oladi. Mozaikaning darajasi (past, mo''tadil yoki yuqori) va turi (segmental, bitta xromosoma, er -xotin xromosoma yoki murakkab mozaikizm) ART muvaffaqiyat darajasiga ta'sir qilishi mumkin. Bundan tashqari, biopsiya qilingan namunadagi mozaikaning ulushi har doim ham butun embriondagi mozaikaning foizini to'g'ridan -to'g'ri ko'rsatma bo'lishi mumkin emas. NGS tomonidan aniqlangan sub-xromosoma o'zgarishlari, asosan, post-zigotik hodisalar bo'lib, ular turli markazlar o'rtasida katta farq qiladi va onaning yoshiga bog'liq emas (Munne va boshq., 2002; Makkoy va boshq ., 2015).

Mozaik embrionlarning xavf tabaqalanishi o'zgaruvchilari mozaikaning foizi, o'ziga xos xromosomalar, monosomiya va trisomiyaga qarshi va to'liq yoki segmentli xromosoma mozaikasining kiritilishi (Grati va boshq., 2018; Preimplantatsiya genetik diagnostikasi xalqaro jamiyati (PGDIS) pozitsiyasi) sifatida aniqlangan. Bayonot 2016, 2019; COGEN lavozim bayonoti 2017).

Mozaikaning implantatsiyaga ta'siri va embrionlarning rivojlanish potentsiali to'liq ma'lum emas, lekin mozaikaning implantatsiya tezligiga ta'sir qilishi ehtimoldan yiroq emas. Euploid/aneuploid mozaik embriondagi g'ayritabiiy hujayralar foiziga xromosoma segregatsiyasi xatosi sodir bo'ladigan bo'linish bosqichi ta'sir qiladi. Masalan, ikkinchi bo'linish paytida sodir bo'lgan xatolar uchinchi bo'linish paytida sodir bo'ladigan xatolarga qaraganda g'ayritabiiy hujayralar sonining ko'payishiga olib kelishi mumkin (Spinella va boshqalar).., 2018). Mozaikaning yuqori darajasi implantatsiya potentsialini pasaytirishi va tushish xavfini oshirishi mumkin. Klinik homiladorlik/embrionning ko'chishi, implantatsiyasi va tirik tug'ilishining aneoploidiya foizi pastroq bo'lgan mozaik embrionlarga nisbatan statistik jihatdan sezilarli pasayishi qayd etilgan (Fragouli va boshq ., 2017; Spinella va boshq ., 2018).

Keyingi avlod sekansirovkasi natijasida monosomiyaning 35% mozaikasi aniqlandi.10-chi xromosoma uchun mozaikizm qayd etilmagan, chunki 20% dan past bo'lgan.

Mozaik embrionlar implantatsiya qilish va sog'lom bolalarga aylanish imkoniyatiga ega. Dunyo bo'ylab markazlardan, mozaik embrionlarning ko'chishidan keyin tirik tug'ilish haqida xabarlar ko'payib bormoqda (Greco va boshq. 2015; Fraguli va boshq. 2017; Munne va boshq., 2017; Spinella va boshqalar, 2018; Viktor va boshqalar. ., 2019). Biroq, bu tadqiqotlarning aksariyatida tug'ruqdan keyingi va tug'ruqdan keyingi davrlarda kuzatuv natijalari haqida ma'lumot etishmaydi. Bu hisobotlarning juda oz qismi amniyosentez yoki tug'ilgan chaqaloqlarning karyotipi kabi prenatal genetik test natijalari haqida gapiradi (Greco va boshq., 2015; Spinella va boshq., 2018; Viktor va boshqalar, 2019).

Aneuploidiya (PGT-A) uchun preimplantatsiya genetik testining asosiy muammolaridan biri-mozaikaning tez-tez uchrab turishi, bu embrionning haqiqiy xromosoma holatini to'g'ri tashxislashda qiyinchiliklarga olib kelishi mumkin. Adabiyotda embrionning mozaikani ko'chirish xavfini baholash tizimini taklif qiladigan ba'zi hisobotlar mavjud bo'lsa -da (COGEN Position Statement, 2017; Grati va boshq., 2018), hali ham ma'lum emaski, tropektoderm hujayralaridagi mozaizm haqiqiy homila mozaikasini qanchalik aks ettiradi. Bu qaysi mozaik embrionlarni xavfsiz ko'chirish mumkinligi haqidagi savolni tug'diradi. Bu savol PGDISni 2016 va 2019 yillardagi lavozim bayonnomalari to'g'risida hisobot berishga undadi (PGDIS lavozim bayonnomalari, 2016, 2019). Ushbu hujjatlarning maqsadi - mozaik embrionlarni o'tkazish bo'yicha mavjud ma'lumotlarni ko'rib chiqish va tavsiyalarni yangilash.

Tabiiy homiladorlik paytida, mozaikizm barcha homiladorlikning 2% ga yopiq platsenta mozaikasi ko'rinishida ta'sir ko'rsatadi (Teylor va boshq., 2014). Tabiiy homiladorlik yoki o'tkazilgan embrionlarda 2 -xromosomaning mozaik monosomiyasi holatlari haqida juda kam ma'lumot bor (Greco va boshq., 2015; Viktor va boshqalar, 2019). Bundan tashqari, mozaik monosomiya 2 bilan tirik tug'ilish haqida xabar beradigan yagona hujjat, tasdiqlovchi diagnostik amniyosentez yoki periferik karyotip tahlilini bildirmagan, ammo mozaik monosomiyaning 2 holatida korionik villus namunasi (CVS) yordamida normal karyotipni tasdiqlagan (Greco va boshq ., 2015).

Biz bilganimizdek, bizning holatimiz amniyosentez va haqiqiy homila mozaikasida (2% mozaik monosomiya 2) mozaik monozomiya 2 (35%) embrioni ko'chirilgandan so'ng, sog'lom tirik tug'ilish haqidagi birinchi ma'lumotdir. paydo bo'lgan chaqaloqning karyotipida.

Vaziyat haqida hisobot

Bu erda biz xromosoma 2 ning mozaik monosomiyasi bo'lgan embrionning ko'chirilishidan so'ng, monosomiya 2 ning haqiqiy homilalik mozaikasi bilan muvaffaqiyatli homiladorlik va sog'lom tirik tug'ilish haqidagi birinchi hisobotni taqdim etamiz. oila bu hisobotdan oldin olingan.

2 yillik bepushtlik bilan er -xotin onalik yoshi, tuxumdon zaxirasi va ayol karyotipining normal holatini ko'rsatdi (46, XX). Anti-Myuller gormoni darajasi 0,75 ng/ml ni tashkil etdi va antral follikulalar soni ikkala tuxumdonda ham oz sonli follikulani ko'rsatdi. Boloniya mezonlariga ko'ra, u tuxumdon zaxirasi kambag'al deb tasniflangan (Ferraretti va boshqalar., 2011). Qisqa antagonist protokoli ishlatilgan va kundalik dozasi 225 IU bo'lgan rekombinant FSH (Gonal F, Merck Serono, Shveytsariya) ning 2025 IU dozasi 9 kun davomida qo'llanilgan. Ovulyatsiya bitta ampulali rekombinant hCG yordamida rag'batlantirildi (rhCG: Ovitrelle®, Merck Serono, Shveytsariya). Tuxumdonlarning boshqariladigan stimulyatsiyasidan so'ng, faqat bitta follikul rivojlanib, faqat bitta oosit olingan. Bu biopsiya qilingan blastokistga aylandi. Trofektoderm biopsiyasidan oldin, 3 -kuni, zona pellucida diodli lazer yordamida teshik ochilgan (RI Saturn 3, Angliya). Urug'lantirilgandan keyingi 5 -kuni, ichki hujayralar massasini yo'qotmasdan, lazer yordamida beshdan sakkiztagacha hujayralar olib tashlandi. Biopsiya qilinganidan bir soat o'tgach, blastokistlar ishlab chiqaruvchining ko'rsatmalariga muvofiq Kitazato vitrifikatsiya vositasi (Kitazato, Yaponiya) yordamida vitrifiyalangan,tashuvchi sifatida Cryotop® dan foydalanish. Biopsiya qilingan material Ion Torrent Ion SingleSeq ™ 96 to'plami (Thermo Fisher Scientific, AQSh) yordamida DNKni ajratish va butun genomni kuchaytirish (WGA) uchun tayyorlangan. NGS protsedurasi Ion Chef System (Thermo Fisher Scientific, AQSh) va Ion GeneStudio S5 (Thermo Fisher Scientific, AQSh) yordamida yakunlandi va ma'lumotlar Ion Reporter Software v5.6 (Thermo Fisher Scientific, AQSh) yordamida tahlil qilindi. NGS 35% mozaikaga ega bo'lgan mozaik monosomiya 2 embrionini aniqladi (1 -rasm). PGT-A dan so'ng, 2-xromosomaning monosomasi uchun mo'ljallangan mozaikali blastokist ishlab chiqaruvchining ko'rsatmasiga binoan Kitazato isitish vositasi bilan eritildi.NGS protsedurasi Ion Chef System (Thermo Fisher Scientific, AQSh) va Ion GeneStudio S5 (Thermo Fisher Scientific, AQSh) yordamida yakunlandi va ma'lumotlar Ion Reporter Software v5.6 (Thermo Fisher Scientific, AQSh) yordamida tahlil qilindi. NGS 35% mozaikaga ega bo'lgan mozaik monosomiya 2 embrionini aniqladi (1 -rasm). PGT-A dan so'ng, 2-xromosomaning monosomasi uchun mo'ljallangan mozaikali blastokist ishlab chiqaruvchining ko'rsatmasiga binoan Kitazato isitish vositasi bilan eritildi.NGS protsedurasi Ion Chef System (Thermo Fisher Scientific, AQSh) va Ion GeneStudio S5 (Thermo Fisher Scientific, AQSh) yordamida yakunlandi va ma'lumotlar Ion Reporter Software v5.6 (Thermo Fisher Scientific, AQSh) yordamida tahlil qilindi. NGS 35% mozaikaga ega bo'lgan mozaik monosomiya 2 embrionini aniqladi (1 -rasm). PGT-A dan so'ng, 2-xromosomaning monosomasi uchun mo'ljallangan mozaikali blastokist ishlab chiqaruvchining ko'rsatmasiga binoan Kitazato isitish vositasi bilan eritildi.ishlab chiqaruvchining ko'rsatmasiga binoan Kitazato isitish vositasi bilan eritilgan.ishlab chiqaruvchining ko'rsatmasiga binoan Kitazato isitish vositasi bilan eritilgan.

Genetik maslahat va yangi ART tsikli variantini batafsil muhokama qilishdan so'ng, er -xotin embrionni mozaik ko'chirishni davom ettirishga qaror qilishdi. Er -xotinning roziligi to'g'risida ma'lumotnoma imzolandi. Bunga embrionning mozaikani ko'chirish xavfi va homiladorlik holatida yaqindan kuzatib borish zarurligi haqidagi ma'lumotlar kiritilgan. Muzlatilgan embrion transferi endometriyal tayyorgarlikdan so'ng rhCG tetikli o'zgartirilgan tabiiy tsikl yordamida amalga oshirildi (Ovitrelle®, Merck Serono, Shveytsariya). Vaginal progesteron jeli 90 mg (8%) Crinone® (Merck Serono, Shveytsariya) bilan, lHKGdan keyin kuniga bir marta, luteal fazani qo'llab -quvvatlaydi. Embrionning mozaikasini ko'chirish natijasida homilador bo'ldi.

Homiladorlikning 17 -haftasida amniyosentez o'tkazildi. Amniyotsitlar madaniyati standart usullar yordamida amalga oshirildi (Xou va boshq . 2014). Karyotip ikkita alohida kulturada mos46, XX (98)/47, XX,+2 (2) bo'lishi kuzatilgan (2 -rasm). Mozaik karyotip natijasini tasdiqlash uchun amniyotsitlarning floresan in situ hibridizatsiyasi (FISH) tahlili ham o'tkazildi (3 -rasm).

Ikki xil madaniyat 46, XX (98)/47, XX,+2 (2) karyotipini aniqladi.

Ikki xil madaniyat 46, XX (98)/47, XX,+2 (2) karyotipini aniqladi.

Amniyotsitlarning floresan in situ hibridizatsiyasi tahlili.Qizil nuqta sentromerik zondni, yashil esa xromosoma 2 uchun telomerik probni ifodalaydi. Floresan in situ hibridizatsiyadan (FISH) so'ng, o'ng rasmda ikkita hujayra ko'rsatilgan, biri diploid normal, ikkinchisi trisomik. Chapdagi rasmda bitta oddiy hujayra va uchta trisomik hujayralar ko'rsatilgan (Vysis CEP2 SpectrumOrange, Vysis Tel2p SpectrumGreen, Abbott Molecular Inc. USA).

IVF mutaxassisi, perinatolog va genetikdan iborat guruh bilan har tomonlama maslahatlashgandan so'ng, er -xotin homiladorlikni muddatigacha davom ettirishga qaror qilishdi. Xomilaning rivojlanishi juda diqqat bilan kuzatildi va er -xotinlarga keng maslahat berildi. Maslahat intrauterin o'sishning kechikishi (IUGR) ehtimolini o'z ichiga oladi. Homiladorlikning 20 -haftasida batafsil ultratovush tekshiruvida patologik topilmalar topilmadi. Oyoq -qo'l, genitoüriner, kraniofasiyal, yurak, o'murtqa yoki buyrak anormalliklari yoki gidronefroz belgilari yo'q edi. Xomilaning ultratovush tekshiruvida homilaning o'sishining kechikish belgilari bo'lmagan 50-chi foiz atrofida normal o'sish kuzatildi (4-rasm). Membranalarning erta yorilishidan so'ng, uzunligi 28 sm bo'lgan 3480 yoshli, 2880 grammlik sog'lom bola tug'iladi.Boshining atrofi 5 sm, fenotipik anomaliyalarsiz, homiladorlikning 37-haftasida tug'ilgan.

Intrauterin xomilalik o'sish jadvali.Qora nuqta homiladorlikning tegishli haftasida homilaning tug'ilish vaznini hisoblab chiqadi.

Periferik karyotip 2% mozaik monosomiya 2 ekanligi aniqlandi [mos45, XX, -2 (2)/46, XX (98)] (5-rasm). Yana bir bor, bu natija FISH tahlili yordamida tasdiqlandi, bu safar 400 ta fazali yadro (6 -rasm). FISH yordamida tahlil qilingan chaqaloqdan bukkal smear namunasi baholangan 250 hujayrada monosomiya yoki trizomiya yo'qligini ko'rsatdi (7 -rasm).

Yangi tug'ilgan chaqaloqning periferik qonli limfotsitlaridan Giemsa tasmasi.( A) 45, XX, -2, ( B) 46, XX bir xil namunadan.

Yangi tug'ilgan chaqaloqning 2 -monosomik periferik qon limfotsitlari xromosomasining FISH tahlili.Qizil nuqta sentromerik probni, yashil esa xromosoma 2 uchun telomerik probni ifodalaydi (Vysis CEP2 SpectrumOrange, Vysis Tel2p SpectrumGreen, Abbott Molecular Inc. USA).

Yonoq smearining FISH tahlili.Qizil nuqta sentromerik probni, yashil esa xromosoma 2 uchun telomerik probni ifodalaydi. Ikkala rasmda ham diploid normal hujayralar ko'rsatilgan (Vysis CEP2 SpectrumOrange, Vysis Tel2p SpectrumGreen, Abbott Molecular Inc. USA).

Muhokama

Bu holat o'ziga xosdir; Biz 39 yoshli ayolning tuxumdon zaxirasi kamaygan, faqat bitta blastokist bo'lgan, tropektoderm biopsiyasi bilan kasallangan bemorning hisobotini taqdim etamiz. Monosomiya 2 ning 35% mozaikasini ko'rsatgan embrionning o'tkazilishi homiladorlikka olib keldi. Amniyosentez mozaik trisomik [mos46, XX (98)/47, XX,+2 (2)] karyotipini aniqladi. Batafsil ultratovush tekshiruvida patologik topilmalar topilmadi va homila IUGR aniqlanmagan holda homilaning normal o'sishini ko'rsatdi. 37-haftada sog'lom qiz bola tug'ildi. FISH yordamida tasdiqlangan periferik qon xromosomalari tahlilida 2% mozaik monosomiya 2 ko'rsatildi [mos 45, XX, -2 (2)/46, XX (98)].

Adabiyotda tug'ilishdan oldin aniqlangan mozaik trizomiya 2 yoki 2-xromosomaning mozaik bo'lmagan qisman o'chirilishi bilan bog'liq o'zgaruvchan fenotipik anomaliyalar bo'lgan holatlar mavjud bo'lsa-da (Sifakis va boshq., 2004; Falk va Kasas , 2007; Chen va boshqalar, 2012; Leroy va boshqalar). al., 2013; Fisch va boshq., 2016; Tug' va boshq., 2017), bizga ma'lumki, mozaik embrionning ko'chirilgandan keyin tirik tug'ilishida hech qachon mozaik monosomiya 2 holati qayd etilmagan.

2 -xromosoma - odamlarning ikkinchi eng katta xromosomasi bo'lib, 1200-1300 genni o'z ichiga oladi (Genetika uy ma'lumotnomasi). Ushbu xromosomaning qisman o'chirilishi aqliy zaiflik, skelet yoki kraniofasial anormallik va rivojlanish kechikishlariga olib keladigan turli xil sindromlar bilan bog'liq (Falk va Kasas, 2007; Leroy va boshq., 2013; Fisch va boshq., 2016). 2-xromosomaning tug'ilishdan oldin aniqlangan mozaik anevloidiyalarini ultratovush tekshiruvida oyoq-qo'llar, genitoüriner, kraniofasiyal, yurak va o'murtqa anomaliyalar, gidronefroz va homilaning o'sishining cheklanishi haqida xabar berilgan (Sifakis va boshq., 2004; Chen va boshq. ., 2012; Tug' va boshq., 2017).

Homiladorlik paytida kuzatuv hech qanday morfologik anormallik belgilari bo'lmagan holda bexosdan o'tdi. Amniotik suyuqlik miqdori va bachadon ichidagi o'sish 50 -chi foiz atrofida bo'lib, oligohidramnioz yoki homila o'sishining cheklanishi kuzatilmagan. Shuningdek, yangi tug'ilgan chaqaloqlarda morfologik anormallik belgilari yo'q edi.

Grati va boshqalar. (2018) homilada sitotrofoblastda aniqlangan mozaikaning (aneuploid/normal) qanchalik aniqlanishini ko'rsatib, tabiiy homiladorlik bo'yicha CVS natijalarini e'lon qildi. Shunga ko'ra, ular homilaning haqiqiy mozaikasi bilan kasallanishini baholash uchun CVS natijalarini keyingi amniyosentez bilan solishtirib, mozaik embrionlarga ustuvorlik berish uchun tavakkalchilik ballari tizimini ishlab chiqdilar. Ular, shuningdek, homilaning tushishi bilan bog'liq bo'lishi mumkin bo'lgan mozaik aneuploidiyalarni o'rganib, uniparental disomiya tekshiruvini o'tkazdilar. 13, 14, 15, 16, 18 va 21 xromosomalarini o'z ichiga olgan mozaikizm va X monosomiyasi xavfi yuqori degan xulosaga kelishdi. Haqiqiy homila mozaikasi yoki homila ishtirokisiz sakkizta trizomiya 2 g'ayritabiiy hujayra chizig'i va sakkizta yopiq platsenta mozaikasi aniqlandi. Uchta trizomiya 2 kontseptsiya mahsulotlarida mozaikaning ulushi 5%ni tashkil etdi. Bundan tashqari,PGTdan keyin mozaik embrionlarni ko'chirish uchun birinchi o'ringa qo'yish uchun dalillarga asoslangan skorlama tizimi ikkita tushish holatini qayd etdi.va boshqalar, 2018).

Inson embrionlari mozaikasida uchta asosiy mexanizm taklif qilingan: anafazaning kechikishi, mitotik disjunksiya va endoreplikatsiya. Ammo har birining hujayralarning xromosoma tuzilishiga ta'siri boshqacha bo'lib, bu blastokistda aniq aneuploidiyaga olib keladi. Anafazaning kechikishida bitta xromatid yadroga kira olmaydi va natijada bitta qiz hujayra disomik bo'ladi, ikkinchisi esa bu "kechikkan" xromosoma uchun monosomik bo'ladi. Ushbu embriondan olingan blastokist mozaik bo'lib, ikkita alohida hujayra chizig'idan iborat bo'ladi: biri disomik va bitta monosomik. Mitotik bo'linmagan hodisada, opa-singil xromatidlar mitoz paytida ajrala olmaydilar, ikkita alohida hujayra chizig'ini yaratdilar, biri monosomiyali, ikkinchisi esa xromosomaning trisomiyasiga bo'linmagan.Embrionlarda bunday turdagi mitotik xatolar tez -tez uchrashi noma'lum, ammo ular embrionning rivojlanish bosqichiga bog'liq deb ishoniladi (Teylor)va boshq., 2014): Qizig'i shundaki, erta bo'linishlarda jinsiy xromosoma malsegregatsiyasi asosan shu turdagi xatolik tufayli yuzaga keladi (Bean va boshq., 2001, 2002). Nihoyat, endoreplikatsiya xromosoma o'zini ko'paytirganda sodir bo'ladi, lekin bu replikatsiyadan keyin hujayra bo'linishi kuzatilmaydi. Natijada, bu hujayra bitta qo'shimcha xromosomaga ega bo'lib, trisomik bo'ladi, qo'shni hujayralar esa disomik bo'lib qoladi. Endoreplikatsiya asosan hujayra tsiklini nazorat qilish punktining ishlamay qolishi bilan bog'liq deb taxmin qilinadi (Teylor va boshq., 2014).

Muayyan xromosoma uchun monosomik va trisomik hujayra liniyalarining paydo bo'lishiga olib kelishi mumkin bo'lgan mozaikaning uchta asosiy sababining yagona mexanizmi-bu disjunksion xato. Parchalanish bosqichida va ichki hujayra massasi va trofoblastning differentsiatsiyasidan oldin sodir bo'ladigan mitotik bo'linmaslik xatosi, bizning bemorimizda 2-xromosoma uchun kuzatiladigan ko'zgu mozaikasini tushuntirishi mumkin. amniyosentezda mozaik trizomiya 2 aniqlandi. Nihoyat, periferik qon xromosomalarini tahlil qilish tug'ruqdan keyingi 2 -monosomiya uchun mozaik edi va bukkal smeardagi epiteliya hujayralari diploid edi.

Amniyosentezda va periferik qon xromosomalarini tahlil qilishda kuzatiladigan mozaikaning past nisbati, tropektoderm biopsiyasi bilan taqqoslaganda, quyidagi ikkita mexanizmdan biri bo'lishi mumkin: tropektodermadagi g'ayritabiiy hujayralarning lokalizatsiyasi yoki euploid hujayralarning imtiyozli o'sishi (Xarton). va boshqalar , 2017). Platsenta test uchun mavjud emas edi.

Mozaik embrionlarning ustuvorligi juda oddiy emas. Preplantatsiya rivojlanishining blastokist bosqichigacha bo'lgan davrda mozaikaning kamayishi haqidagi bir qancha farazlar mavjud: embrional o'lim modeli, klonal tükenme modeli va trisomik/monosomik qutqarish modeli. Embrional o'lim modeli shuni ko'rsatadiki, yuqori mozaikali yoki to'liq anevloidli embrionlar implantatsiya qilish uchun omon qolmaydi; ammo, to'liq euploid va past darajali mozaik embrionlarni joylashtirish imkoniyati bor. Boshqacha qilib aytganda, embrional o'lim modellari aneuploid hujayralar nisbati asosida embrionlarga qarshi tanlovni chaqiradi. Bu mozaik embrionlarni implantatsiya qilishda eng ko'p qabul qilingan model.va parchalanish paytida mitotik xatodan keyin hosil bo'lgan aneuploid hujayra chiziqlari omon qolmaydi va implantatsiya paytida yo'qoladi, shuning uchun homila to'liq euploid hujayralardan iborat. Klonal emirilish modeli apoptozni yoki mozaik embrion ichida aneuploid hujayralarning kamayishini tasvirlaydi (Boltonva boshqalar , 2016). Trisomik/monosomik qutqarish modeli shuni ko'rsatadiki, aneuploid hujayralar, o'z navbatida, mitotik xromosomalarning ko'payishi yoki yo'qolishi natijasida diploid hujayralarga olib kelishi mumkin. Boshqacha qilib aytganda, bu dastlab aneuploid bo'lgan, lekin qutqaruv mexanizmlari orqali euploid hujayralarga aylanadigan hujayra liniyalarining o'z-o'zini to'g'rilashini ko'rsatadi (Makkoy , 2017).

Bemorlarga mozaik embrionni o'tkazish bo'yicha maslahat berish juda muhimdir. Mozaik embrionni o'tkazishdan oldin batafsil genetik maslahat va perinatologga yuborish, shuningdek, homiladorlikning 14 -haftasida erta amniyosentezni o'tkazish tavsiya etiladi. Mozaikaning mexanizmlarini hisobga olgan holda, shuni esda tutish kerakki, embrionning xromosoma holati va tug'ruqdan keyingi yoki tug'ruqdan keyingi xromosomalar o'rtasidagi farqlar, masalan, monosomiya va trisomiya bo'lishi mumkin.

Bizning holatlar to'g'risidagi hisobotimiz shuni ko'rsatadiki, inson embrionlarida disozitsion bo'lmagan mitoz xatosidan kelib chiqqan mozaikizm monosomik va trisomik hujayra qatorlariga olib keladi. Trofektoderm biopsiyasining tabiati, tasodifiy biopsiya joyi va olib tashlangan hujayralar soniga qarab, trisomiya kuzatilmasligi mumkin. Shuning uchun, bizning ishimiz natijasini mozaik embrionlarni o'tkazishning klinik dilemmasiga ekstrapolyatsiya qilishda, mozaik monosomik embrionlarni o'tkazishning "xavfsizroq" variantiga diqqat bilan yondashish kerak. To'g'ridan -to'g'ri qarorlar qabul qilish uchun qo'shimcha hisobotlar va yangi tug'ilgan chaqaloqlarning karyotip tahlilini o'z ichiga olgan ma'lumotlar kerak.

Mozaik embrionlarni ko'chirish ARTda yangi davrni ko'rsatadi va kelgusidagi tadqiqotlar va holatlar haqida hisobotlar klinisyenlarga mozaik embrionlar to'g'risida xavfsiz qarorlar qabul qilishga yordam berish uchun kerak. Ideal holda, kelajakdagi tadqiqotlar tug'ruqdan keyingi davrda platsenta to'qimasi va teri hujayralari kabi ko'proq hujayralarni tahlil qilishni o'z ichiga oladi. PGT-A bir qator ko'rsatkichlar uchun keng qo'llaniladi va NGSning maydonga kiritilishi va mozaikaning aniqlanishi ortishi bilan klinisyenlar mozaik embrionlarni ko'chirishni ko'rib chiqishda xavfsiz qarorlar qabul qilishlari uchun ko'proq ma'lumotli ma'lumotlarni talab qiladi. Shu bilan birga, klinisyenlarga bemorlarga embrionning mozaikani ko'chirishining mumkin bo'lgan xavflari, jumladan, homilaning haqiqiy mozaikasi to'g'risida keng qamrovli maslahat berishni qat'iy tavsiya qilinadi.

Mualliflarning rollari

Semra Kahraman, prof .: qo'lyozma loyihasi va tahriri, tanqidiy muhokama. Murat Cetinkaya, fan doktori, doktorlik: qo'lyozma loyihasi va tahriri, genetik ma'lumotlarni baholash. Beril Yuksel, dots. Prof .: qo'lyozma loyihasi va tahriri. Mesut Yesil, magistr: baliq tahlillari. Karolin Pirkevi Cetinkaya, fan doktori: qo'lyozma tahriri.